丁基疏水色譜柱是一款以粒徑為2.5um的,丁基鍵合無孔型親水性聚合物基質(zhì)為填充劑的疏水作用色譜柱。適用于蛋白質(zhì)、單抗、酶等生物大分子的分離分析。由于和藥物安全以及生產(chǎn)成本息息相關(guān),對(duì)于重組蛋白藥物(包括單抗)的非均一性分析變得越來越被重視。
采用具有適度疏水性的填料,以含鹽水溶液作流動(dòng)相,借助于溶質(zhì)與固定相間的疏水相互作用實(shí)現(xiàn)分離的色譜方法。其保留機(jī)理與反相色譜基本相同,所不同的是其固定相的疏水性不如反相固定相強(qiáng),多為低密度分布的甲基、乙基、丙基、丁基和苯基等。疏水作用色譜主要用于蛋白質(zhì)的分離與純化。
丁基疏水色譜柱的結(jié)構(gòu)特點(diǎn):
1、基礎(chǔ)材料:
基礎(chǔ)材料通常是硅膠或聚合物,具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性和機(jī)械強(qiáng)度,能夠承受高壓操作條件下的工作要求。
2、疏水性功能基團(tuán):
表面常常修飾有疏水性功能基團(tuán),如丁基(butyl)基團(tuán),這些功能基團(tuán)能夠與疏水性化合物發(fā)生疏水相互作用,實(shí)現(xiàn)對(duì)化合物的分離。
3、粒徑和孔徑:
填料通常具有較小的顆粒粒徑和較窄的孔徑分布,以提供更高的分離效率和分辨率,適用于分析復(fù)雜樣品。
4、長(zhǎng)度和直徑:
長(zhǎng)度和直徑會(huì)影響分離效果和分析速度。通常,較長(zhǎng)的色譜柱可提供更好的分離效果,而較大直徑的色譜柱可提高樣品處理速度。
5、表面修飾:
填料表面可能經(jīng)過化學(xué)修飾,以增強(qiáng)其疏水性能和選擇性,改善分離效果,適用于更廣泛的化合物分析。
6、負(fù)載量:
填料負(fù)載量影響著其分離能力和樣品容量。較高的填料負(fù)載量通常意味著更好的分離效果和更高的樣品處理容量。
7、色譜柱保護(hù):
為了延長(zhǎng)丁基疏水色譜柱的使用壽命,常常會(huì)在色譜柱前端安裝保護(hù)柱,用于過濾雜質(zhì)和延緩填料的老化,保護(hù)色譜柱的性能。
8、耐高壓性能:
丁基疏水色譜柱通常具有良好的耐高壓性能,能夠承受高壓操作條件下的工作要求,確保色譜分析的穩(wěn)定性和可靠性。