親水色譜柱是一種專門設(shè)計用于分離親水性和極性化合物的色譜柱。利用固定相上的親水性基團(tuán)與樣品中的極性基團(tuán)之間的相互作用，實現(xiàn)對極性化合物的有效分離。其工作原理基于親水作用和可能的離子交換作用。在分離過程中，水相固定相上的親水性基團(tuán)與待分離物質(zhì)中的極性基團(tuán)發(fā)生相互作用，從而實現(xiàn)物質(zhì)的分離和純化。

　　親水色譜柱的特點主要體現(xiàn)在以下幾個方面：

　　1、分離原理d特：

　　分配平衡與親水相互作用：利用樣品在流動相和固定相中的分配平衡，樣品中的極性官能團(tuán)與固定相表面進(jìn)行親水相互作用。其核心思想在于利用高乙腈低水含量的流動相與極性固定相的組合，通過按照親水性由小到大的順序梯度洗脫分析物。

　　2、固定相特性：

　　極性強(qiáng)：親水作用色譜柱的固定相是親水的，并且通常在一定pH范圍內(nèi)是帶電荷的。親水性越強(qiáng)的化合物，被保留的時間越長。常見的固定相類型有純硅膠柱、氨基柱、二醇基柱、酰胺基柱等。

　　耐水性要求高：專為親水作用色譜設(shè)計的色譜柱，對固定相的耐水性要求更高，否則會因固定相的水解出現(xiàn)基線噪音大、色譜柱壽命短等問題。例如，純硅膠柱有固定相不易流失的優(yōu)點，在使用CAD、ELSD和LC-MS檢測器時，受歡迎；氨基柱特別適合碳水化合物（糖類）分離。

　　3、流動相特點：

　　有機(jī)相比例高：流動相中有機(jī)相的比例較高，而水的比例相對較低。典型的HILIC分離條件中，流動相中水的含量通常在3%至40%之間波動。當(dāng)水的含量超過40%時，保留效果往往會減弱。

　　水膜形成：普遍認(rèn)為HILIC流動相中的水會被吸附到極性固定相的表面形成水膜，然后分析物在水膜和流動相之間進(jìn)行液液分配作用，加上極性官能團(tuán)和固定相之間的氫鍵作用力、離子官能團(tuán)之間的靜電作用力等，實現(xiàn)被分析物的保留。水膜的作用非常重要，所以HILIC流動相中至少含有3%的水。

　　4、分離優(yōu)勢：

　　改善強(qiáng)極性物質(zhì)保留行為：親水作用色譜是一種用來改善在反相色譜中保留較差的強(qiáng)極性物質(zhì)保留行為的色譜技術(shù)。它能夠成功提高對極性非常強(qiáng)的物質(zhì)的保留，為包含極性物質(zhì)和可離子化合物的混合物提供正交于反相色譜的獨立分離模式。

　　適用于多種化合物：對于強(qiáng)極性和親水性的小分子物質(zhì)、堿性化合物以及一些難以在反相色譜中保留的化合物，親水作用色譜具有較好的分離效果。

　　5、應(yīng)用范圍廣：

　　復(fù)雜樣品的分析：親水作用色譜技術(shù)以其d特的分離模式和優(yōu)勢，在復(fù)雜樣品的分析中展現(xiàn)出巨大潛力?？捎糜谒幬锓治?、生物化學(xué)、環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域。

　　與質(zhì)譜聯(lián)用：由于流動相中有機(jī)相比例高，這樣的流動相組成尤其有利于提高電噴霧離子化質(zhì)譜（ESI-MS）的靈敏度。